1、血清內(nèi)源性物質(zhì)
1)類風(fēng)濕因子：血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）在ELISA試劑盒檢測中，可與ELISA試劑盒體系中的捕獲抗體及酶符號二抗的FC段直接結(jié)合，然后導(dǎo)致檢測OD值偏高。
2)補體：ELISA試劑盒體系中固相一抗和符號二抗過程中，抗體分子發(fā)作變構(gòu)，其FC段的補體C1q分子結(jié)合位點被顯露出來，使C1q可以將二者連接起來，然后形成檢測OD值偏高。
3)嗜異性抗體:人類血清中含有能與嚙齒類動物結(jié)合的天然嗜異性抗體，可將ELISA試劑盒體系中一抗和二抗連接起來，也能形成檢測OD值偏高。
2、血清外源性物質(zhì)
外源性物質(zhì)常常是因為用于ELISA試劑盒測定的血標(biāo)本的收集、儲存等不妥所形成的。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細菌污染、標(biāo)本儲存過久、標(biāo)本凝聚不全和采血管中添加物等影響。
1)標(biāo)本溶血
因為各種人為原因引起的標(biāo)本溶血，均可因紅細胞損壞溶解時釋放出許多具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為符號的ELISA試劑盒測定中，會導(dǎo)致非特異性顯色，干擾測定作用。
2)標(biāo)本受細菌污染：因菌體中或許含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因而，被細菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本相同，亦可發(fā)生非特異性顯色而干擾測定作用